𝘌𝘯𝘻𝘺𝘮𝘦𝘓𝘪𝘯𝘬𝘦𝘥 𝘐𝘮𝘮𝘶𝘯𝘰𝘴𝘰𝘳𝘣𝘦𝘯𝘵 𝘈𝘴𝘴𝘢𝘺 (𝘌𝘓𝘐𝘚𝘈) is core analytical technique in immunology, enabling detection and quantification of antigens or antibodies within biological samples[1]. 

𝗣𝗿𝗶𝗻𝗰𝗶𝗽𝗹𝗲 𝗮𝗻𝗱 𝗠𝗲𝗰𝗵𝗮𝗻𝗶𝘀𝗺 
ELISA relies on the 𝘪𝘯𝘵𝘦𝘳𝘢𝘤𝘵𝘪𝘰𝘯 𝘣𝘦𝘵𝘸𝘦𝘦𝘯 𝘢𝘯 𝘢𝘯𝘵𝘪𝘨𝘦𝘯 𝘢𝘯𝘥 𝘢𝘯 𝘢𝘯𝘵𝘪𝘣𝘰𝘥𝘺, where 𝘣𝘪𝘯𝘥𝘪𝘯𝘨 𝘵𝘳𝘪𝘨𝘨𝘦𝘳𝘴 𝘢 𝘤𝘰𝘭𝘰𝘳𝘪𝘮𝘦𝘵𝘳𝘪𝘤 𝘴𝘪𝘨𝘯𝘢𝘭 𝘷𝘪𝘢 𝘢𝘯 𝘦𝘯𝘻𝘺𝘮𝘦-𝘭𝘪𝘯𝘬𝘦𝘥 𝘴𝘦𝘤𝘰𝘯𝘥𝘢𝘳𝘺 𝘢𝘯𝘵𝘪𝘣𝘰𝘥𝘺 𝘢𝘯𝘥 𝘴𝘶𝘣𝘴𝘵𝘳𝘢𝘵𝘦 𝘳𝘦𝘢𝘤𝘵𝘪𝘰𝘯. The intensity of this color change, detected spectrophotometrically, correlates directly with the concentration of the analyte [2]. 

𝗧𝘆𝗽𝗲𝘀 𝗼𝗳 𝗘𝗟𝗜𝗦𝗔 
• 𝘋𝘪𝘳𝘦𝘤𝘵 𝘌𝘓𝘐𝘚𝘈 – The antigen is immobilized, and detection occurs using an enzyme-labeled primary antibody. 
• 𝘐𝘯𝘥𝘪𝘳𝘦𝘤𝘵 𝘌𝘓𝘐𝘚𝘈 A secondary antibody detects the bound primary antibody, amplifying the signal. 
• 𝘚𝘢𝘯𝘥𝘸𝘪𝘤𝘩 𝘌𝘓𝘐𝘚𝘈 Uses two antibodies binding distinct epitopes of the same antigen, offering high sensitivity and specificity. 

𝗔𝗽𝗽𝗹𝗶𝗰𝗮𝘁𝗶𝗼𝗻𝘀 𝗔𝗰𝗿𝗼𝘀𝘀 𝗥𝗲𝘀𝗲𝗮𝗿𝗰𝗵 𝗮𝗻𝗱 𝗠𝗲𝗱𝗶𝗰𝗶𝗻𝗲 
𝘊𝘭𝘪𝘯𝘪𝘤𝘢𝘭 𝘥𝘪𝘢𝘨𝘯𝘰𝘴𝘵𝘪𝘤𝘴 – detection of viral infections (HIV), autoantibodies, and hormones (e.g. insulin). 
𝘐𝘮𝘮𝘶𝘯𝘰𝘭𝘰𝘨𝘺 𝘳𝘦𝘴𝘦𝘢𝘳𝘤𝘩 – quantifying cytokines (IL-6) from immune cells. 
𝘝𝘢𝘤𝘤𝘪𝘯𝘦 𝘥𝘦𝘷𝘦𝘭𝘰𝘱𝘮𝘦𝘯𝘵 – monitoring antibody responses after immunization.  

𝗘𝗟𝗜𝗦𝗔 𝗶𝗻 𝗖𝗔𝗥-𝗧 𝗣𝗼𝘁𝗲𝗻𝗰𝘆 𝗮𝗻𝗱 𝗤𝘂𝗮𝗹𝗶𝘁𝘆 𝗖𝗼𝗻𝘁𝗿𝗼𝗹 
In CAR-T therapy development, ELISA is a functional assay for validating T cell potency. Upon encountering target APCs, CAR-T cells release cytokines IFN-γ, IL-2 [3]. Readouts serve as 𝘲𝘶𝘢𝘯𝘵𝘪𝘵𝘢𝘵𝘪𝘷𝘦 𝘪𝘯𝘥𝘪𝘤𝘢𝘵𝘰𝘳𝘴 𝘰𝘧 𝘊𝘈𝘙-𝘛 𝘧𝘶𝘯𝘤𝘵𝘪𝘰𝘯𝘢𝘭𝘪𝘵𝘺, 𝘸𝘩𝘦𝘵𝘩𝘦𝘳 𝘵𝘩𝘦 𝘦𝘯𝘨𝘪𝘯𝘦𝘦𝘳𝘦𝘥 𝘤𝘦𝘭𝘭𝘴 𝘳𝘦𝘴𝘱𝘰𝘯𝘥 𝘵𝘰 𝘢𝘯𝘵𝘪𝘨𝘦𝘯 𝘳𝘦𝘤𝘰𝘨𝘯𝘪𝘵𝘪𝘰𝘯. During GMP release testing, 𝘌𝘓𝘐𝘚𝘈 𝘤𝘰𝘮𝘱𝘭𝘦𝘮𝘦𝘯𝘵𝘴 𝘤𝘺𝘵𝘰𝘵𝘰𝘹𝘪𝘤𝘪𝘵𝘺 𝘢𝘴𝘴𝘢𝘺𝘴 [4].  

𝗔𝗻𝗲𝗰𝗱𝗼𝘁𝗮𝗹 𝗟𝗲𝗮𝗿𝗻𝗶𝗻𝗴 
During an Xlabs in Göttingen, we were introduced to ELISA through a detective game – identifying the ´criminal´ spreading a virus based on color change. Ironically, I turned out to be the culprit in our mock ´outbreak´.   

𝗤𝘂𝗲𝘀𝘁𝗶𝗼𝗻 𝗳𝗼𝗿 𝗬𝗼𝘂  Have you ever designed your own ELISA assay?   

Stay tuned for 𝗗𝗮𝘆 𝟯𝟲: 𝗠𝘂𝗰𝘂𝘀 𝗦𝗲𝗰𝗿𝗲𝘁𝗶𝗼𝗻 𝗔𝘀𝘀𝗮𝘆 – 𝗕𝗲𝘆𝗼𝗻𝗱 𝗖𝗹𝗮𝘀𝘀𝗶𝗰𝗮𝗹 𝗘𝗟𝗜𝗦𝗔   

𝗥𝗲𝗳𝗲𝗿𝗲𝗻𝗰𝗲𝘀 
1. DOI: 10.1016/0019-2791(71)90454-x 
2. DOI: 10.1385/1592590497 
3. DOI: 10.1038/s41591-018-0290-5 
4. https://link.springer.com/chapter/10.1007/978-3-031-30040-0_8   

#100DaysOfImmunology #ELISA #Immunoassay #CytokineDetection #CARTherapy #Immunotherapy #CellTherapy #TranslationalResearch #MolecularDiagnostics #ImmunologyEducation